Bossowie – wielkie, silne potwory pojawiające się w Don't Starve. Są o wiele trudniejsze do pokonania niż podstawowe potwory i stanowią śmiertelne zagrożenie dla niedoświadczonych graczy. Dwa lub trzy ciosy jednego z tych potworów zabijają większość postaci bez zbroi. Dzieleni są na dwie podkategorie.

1. Przeciwnicy naczelni to wielkie stworzenia, które spotkać można w ich naturalnych środowiskach. Pojawiają się niezależnie od pory roku i są bardzo niebezpieczni. Aby je pokonać należy się uzbroić i pod żadnym pozorem nie przychodzić nieprzygotowanym bo może się to zakończyć śmiercią.

2. Giganci to przeciwnicy naczelni związani z porami roku. Gigant pojawia się w losowym momencie przypisanej sobie pory roku, aby zaatakować gracza i siać spustoszenie. Giganci są bardzo niebezpieczni, jeżeli gracz nie jest przygotowany na ich przybycie. W podstawowej wersji gry występuje tylko jeden gigant - jeleniocyklop, który pojawia się w trakcie trwania zimy. W Panowaniu Gigantów dochodzą do niego borsukoniedźwiedź (jesień), gęsiołoś (wiosna) oraz muchosmok (lato). Borsukoniedźwiedź, jeleniocyklop i gęsiołoś funkcjonują również jako giganci w Don't Starve: Razem. W dwóch pozostałych dodatkach istnieje po jednym gigancie: fokornado w trakcie pory huraganowej w Rozbitkach i antyczny herald w trakcie Aporkalipsy w Świniogrodzie.

	Drzewiec (ang. Treeguard) – neutralny potwór, który powstaje z drzew, kiedy gracz ścina okoliczny las. Posiada on bardzo dużo zdrowia oraz zadaje dotkliwe obrażenia, które łatwo mogą doprowadzić do śmierci pozbawionego odpowiedniej zbroi gracza. Po trzech dniach mamy 1,3% szanse na pojawienia się jednego lub więcej drzewców. Przed dniem 31, jedynie jeden drzewiec pojawi się, potem 1 lub 2 po 30 dniu oraz powyżej 3 po dniu 80. Drzewce mogą przekształcić się z dowolnej wielkości drzewa, wliczając te, zasadzone przez gracza. Po zabiciu drzewca, pozostaje żywa kłoda. Istnieją trzy wielkości Drzewca - mała (70% skali), normalna (100% skali) oraz wysoka (125% skali) w zależności z jakiej wielkości drzewa powstaną. Wielkość determinuje również ich zdrowie, siłę, zasięg ataku oraz szybkość poruszania się.
	Pajęcza Królowa (ang. Spider Queen) – przeciwnik naczelny występujący w grze. Może się pojawić z kokonu pająków trzeciego poziomu, kiedy gracz jest blisko; zniknie po 1-2 minutach zamieniając się w kokon pająków poziomu pierwszego. Zabicie Pajęczej Królowej jest jedynym sposobem na zdobycie pajęczego kapelusza. Jest pokryta pajęczyną na tułowiu, ma długie, ostro zakończone nogi i zamykające się w poziomie wyposażone w 12 ostrych zębów usta. Pajęcza Królowa będzie atakować każde stworzenie, które zauważy, nawet ptaki. Służące jej pająki również zaatakują stworzenie, które aktualnie ma zamiar zabić królową.
	Antyczny strażnik (ang. Ancient Guardian) – przeciwnik naczelny, którego można spotkać tylko w ruinach, dokładniej w labiryncie. Z wyglądu przypomina Mechaniczną wieżę, jednak jest od niego znacznie większy. Po zabiciu upuszcza 8 sztuk mięsa, dużą zdobioną skrzynię oraz róg antycznego strażnika (potrzebny do stworzenia tulecytowego strażnika).
	Cieniste Figury Szachowe to przeciwnicy dostępni w DST. Powstają podczas Księżyca w Nowiu w wyniku uderzenia młotem figur szachowych - jeżeli postać zbada figurę szachową zauważy jak ta się trzęsie. Jeżeli w pobliżu cienistych figur, znajdą się nie uderzone młotkem marmurowe i kamienne figury gońca, skoczka lub wieży one również się przemienią. Bazują na mechanicznych figurach szachowych (gońcu, skoczku i wieży) aczkolwiek ich ataki wyglądają inaczej, bliski mechanicznym pierwowzorom jest jedynie cienisty skoczek. Po zabiciu pozostawiają po sobie koszmarne paliwo i przedsionek ciemności .
	Malbatros (ang. malbatross) - jest przeciwnikiem naczelnym dostępnym w DST, wyglądem przypomina wielkiego ptaka z ogonem w kształcie płetwy. Można go spotkać na głębokim oceanie, gdzie nurkuje łowiąc i jedząc ryby. Co trzy dni od znalezienia go zmienia miejsce swojego pobytu. Po zabiciu pojawia się ponownie od 5 do 15 dni, upuszcza 3 pióra malbatrosa, 7 sztuk mięsa, 2 niebieskie klejnoty (30% szans na uzyskanie 4), 1 dziób malbatrosa. Istnieje 5% szansy na to, że upuści żółty klejnot. Żeby podjąć z nim walkę należy go najpierw sprowokować jakąś bronią dystansową np. bumerangiem lub dmuchawką. Inaczej będzie się trzymał na odległość i będzie neutralny dla gracza.
	Królowa pszczół (ang. Bee Queen) − nowy potwór naczelny dodany w 5 aktualizacji do Nowe Rządy. Wyglądem przypomina ona gigantyczną pszczołę z dwoma ogromnymi skrzydłami. Jej odwłok wygląda jak ociekający miodem ul zakończony żądłem. Pojawi się ona wtedy, gdy gracz zada obrażenia gigantycznemu ulowi. W miejscu pojawienia się Królowej na trawie pojawi się plama miodu. Po przebudzeniu będzie podążać w kierunku gracza, który zadał obrażenia gigantycznemu ulowi oraz będzie przywoływać pszczoły strażniczki. Po śmierci pozostawia ona po sobie pszczelą koronę, 2-3 sztuk miodu, 1-2 plastrów miodu, 1 żądło oraz 6-7 mleczka pszczelego.
	Mrówkolew (ang. Antlion) – stworzenie występujące w Don't Starve: Razem - Nowe Rządy. Zamieszkuje biom pustynny oraz można go spotkać tylko i wyłącznie latem podczas burzy piaskowej. Gracz może z nim handlować błyskotkami w celu otrzymania w zamian kamienia pustynnego. W przypadku gdy podarujemy mu zabawki plażowe ofiaruje nam schemat leniwego dezertera. Ofiarowując mu różne błyskotki niwelujemy szansę na powstawanie lejów krasowych oraz zapadlisk ziemi. W przypadku zaniechania handlu Mrówkolew schowa się pod ziemię oraz będzie wywoływał trzęsienia i osuwanie ziemi. Jeżeli gracz wręczy Mrówkolwu termiczny kamień (rozgrzany lub o zamrożony), ten rozdrażni się i zacznie walkę.
	Klaus jest Potworem Naczelnym dodanym w Don't Starve: Razem w aktualizacji Nowe Rządy. Przypomina wielkiego, ślepego Krampusa. Pojawia się gdy umieścimy Poroże Jelenia w zamku Worka z Prezentami. Klucz nie będzie pasował i zamieni się w odłamki kości. Klaus pojawia się z dwoma Kryształowymi Jeleniami, jednym niebieskim, drugim czerwonym. Zabicie któregokolwiek z nich, lub odseparowanie ich na odpowiednią odległość spowoduje zwiększenie zadawanych przez niego obrażeń, jego zdrowia, otrzyma on też 63,6% odporności na ataki i znacznie urośnie. Jest także zdolny do przywoływania 2-6 Krampusów w trakcie walki. Po zabiciu zostanie wskrzeszony przez swój amulet, a jego łańcuchy opadną uwalniając wielkie szczęki na jego brzuchu które dają mu dostęp do nowego ataku o dużym zasięgu: ugryzienia. Po zabiciu wypadnie z niego prawdziwy klucz do worka, węgiel i potworne mięso. Po odblokowaniu worka gracz otrzyma 4 paczuszki zawierające cenne przedmioty. Jeżeli jelenie są nadal żywe, ich obroże pękną, klejnoty wypadną i zwierzęta zmienią się w zwykłe ślepe jelenie. Klejnoty można następnie zebrać.
	Grzybucha (ang. Toadstool) – stworzenie dostępne dla posiadaczy bety Nowych Rządów dla Don't Starve: Razem (DST). Grzybucha pośmiertnie pozostawia 1 sztukę żabich udek, od 3 do 5 sztuk mięsa (wypadają zawsze 3 sztuki, na 4 jest 50% szans, a na 5 - 25%), 1-3 czerwonych, zielonych i niebieskich grzybów (każdego wypada zawsze jedna sztuka, kolejne dwie mają po 33% szans na wypadnięcie) oraz grzybia skóra, schemat na światłogrzyb lub świecipelusz oraz schemat na jeden z 3 kolorów grzybowych kapeluszy. Grzybia skóra wypada zawsze gdy grzybucha ma około 66% zdrowia i 33% zdrowia, ostatnia wypada w momencie śmierci. Grzybuchę można przywołać, niszcząc grzybowe drzewo w jaskiniach, które posiada własną ikonę na mapie i nazywa się tak samo jak stworzenie.
	Leśny ożywiony szkielet (ang. Reanimated Skeleton) – przeciwnik naczelny dodany do Don't Starve: Razem w aktualizacji Nowe Rządy. Jest on jedną z 3 wersji tego potwora - pozostałe to jaskiniowy ożywiony szkielet i pradawny tkacz koszmarów. Leśny ożywiony szkielet jest podatny na działanie cienistej kadzielnicy oraz w przeciwieństwie do innych rodzajów ożywionego szkieletu nie posiada żadnych cytatów. Aby przywołać tę wersję należy użyć przedsionka ciemności na ukończonym starym szkielecie na powierzchni nocą - oprócz pojawienia się bossa spowoduje to także pozbawienie postaci 40 punktów poczytalności. Leśny ożywiony szkielet umiera gdy rozpoczyna się nowy dzień. Po zabiciu pozostawia on łup w postaci kolejnego przedsionka ciemności, 8 skamielin oraz od 2 do 4 sztuk koszmarnego paliwa.
	Jaskiniowy ożywiony szkielet (ang. Reanimated Skeleton) – przeciwnik naczelny dodany do Don't Starve: Razem w aktualizacji Nowe Rządy. Jest on jedną z 3 wersji tego potwora - pozostałe to leśny ożywiony szkielet i pradawny tkacz koszmarów. Jaskiniowy ożywiony szkielet jest podatny na działanie cienistej kadzielnicy. Aby przywołać tę wersję należy użyć przedsionka ciemności na ukończonym starym szkielecie w jaskiniach - oprócz pojawienia się bossa spowoduje to także pozbawienie postaci 40 punktów poczytalności. Po zabiciu pozostawia on łup w postaci kolejnego przedsionka ciemności, 8 skamielin oraz od 2 do 4 sztuk koszmarnego paliwa.
	radawny tkacz koszmarów lub Atrialny ożywiony szkielet (ang. Ancient Fuelweaver) – przeciwnik naczelny dodany do Don't Starve: Razem w aktualizacji Nowe Rządy. Jest on jedną z 3 wersji tego potwora - pozostałe to jaskiniowy oraz leśny ożywiony szkielet. W odróżnieniu od nich jest on w stanie wypowiadać zrozumiałe zdania cechujące się głównie pewnością wygranej i smutkiem spowodowanym upadkiem cywilizacji istniejącej niegdyś w ruinach. Aby przywołać tę wersję należy użyć przedsionka ciemności na ukończonym starym szkielecie w atrium w pobliżu antycznych wrót otworzonych antycznym kluczem. Cienista kadzielnica nie ma na niego żadnego wpływu. Po zabiciu pozostawia on łup w postaci róży, 8 skamielin, kościanej zbroi i hełmu oraz od 2 do 4 sztuk koszmarnego paliwa. Jeśli postać opuści pole bitwy przed zakończeniem walki, pradawny tkacz koszmarów pozostawi po sobie jedynie 8 skamielin i przedsionek ciemności. Następnie pradawna brama zacznie się destabilizować, zużywając antyczny klucz i zabijając wszystkie halucynacje w zasięgu wzroku. Po 4 minutach wszystkie stworzenia obecne w ruinach odrodzą się, antyczne stacje pseudonauki, antyczne pomniki i łupy ze zdobionych skrzyń zostaną odnowione, a w miejsce dużej zdobionej skrzyni pojawi się antyczny strażnik. Aby ponownie móc umieścić antyczny klucz w antycznych wrotach należy odczekać 20 dni.
	Jeleniocyklop (ang. Deerclops) – potwór naczelny, król zimy, dodany w aktualizacji Zimowe opowieści. Jest aktywny wyłącznie w czasie trwania zimy. Wygląda jak wielki jeleniopodobny stwór. Ma jedno wielkie oko, jasnoniebieską sierść, stoi na dwóch łapach i posiada grube rozbudowane rogi. Charakteryzuje się wysokim zdrowiem i potężnymi obrażeniami. Może niszczyć zbudowane struktury, powodując wypadnięcie połowy rzeczy, z których były zrobione. Jeleniocyklop jest bardzo agresywny, atakuje większość istot, które napotka. Jego monstrualne rozmiary sprawiają, iż postać znajdująca się blisko potwora, traci drastycznie zdrowie psychiczne. Jeleniocyklop wymaga 4 ataków lodowego berła do zamrożenia. Zabity, pozostawia po sobie 8 kawałków mięsa oraz oko jeleniocyklopa, które odnawia duży zapas zdrowia oraz głodu kosztem utraty zdrowia psychicznego. Jest też potrzebne do zbudowania tulecytowego strażnika, a w Panowaniu Gigantów także ocznej parasolki. Pojawia się pod koniec trwania zimy. Znika podczas lata, a w DLC podczas rozpoczęcia wiosny.
	Gęsiołoś (ang. Moose/Goose) – gigant dodany w DLC - Panowanie Gigantów. Jest skrzyżowaniem gęsi z łosiem. Spotkać go można podczas wiosny (także podczas innych pór roku, jeżeli ustawimy Gęsiołosie na "Lots"). Atakuje, wyciągając swoją szyję i bodąc gracza, czasami wytrącając mu broń z ręki i głośno przy tym rycząc. Jest trochę szybszy od gracza, ale jeżeli będziemy nieustannie iść, Gęsiołoś nie zada nam żadnych obrażeń.
	Muchosmok (ang. Dragonfly) – gigant, który został dodany w DLC - Panowanie Gigantów. Muchosmok może pojawić się w czasie trwania lata. Ma możliwość ziania ogniem. Jest jedynym gigantem, który atakuje tylko wtedy, gdy zanadto się do niego zbliży. Muchosmok przylatuje latem. Nie atakuje gracza jak Jeleniocyklop - staje się agresywny tylko wtedy, gdy podejdzie się do niego za blisko (podobnie jak żaba). Lata po okolicy, niszcząc i podpalając napotkane obiekty. Zjada popiół, który wypada ze spalonych przedmiotów. Gdy Muchosmok jest zdenerwowany zaczyna świecić oraz podpalać gracza, gdy zanadto się zbliży. Taka forma Muchosmoka może się okazać sposobem ochrony przed Grue, jednak to nie jest dobry pomysł, by stać obok tego agresywnego stwora podczas nocy.
	Borsukoniedźwiedź (ang. Bearger) – jeden z gigantów dodanych w DLC - Panowanie Gigantów. Borsukoniedźwiedź to skrzyżowanie borsuka i niedźwiedzia. Po śmierci pozostawia mięso i futro. Pojawia się głównie jesienią (może jednak pojawić się podczas innej pory roku, gdy ustawimy go w opcjach świata na More lub Lots). Posiada ogromny apetyt i pozostawiony bez kontroli może szybko ogołocić okolicę z pożywienia - potrafi zjadać mięso z garnków oraz suszarni. Nie je warzyw, ale nie pogardzi jagodami. Jeśli zaatakuje nas w obozie, to w poszukiwaniu jedzenia może zniszczyć suszarnię, lodówkę, a także ule. Można łatwo manipulować jego zachowaniem, kładąc jakiekolwiek pożywienie w zastawionym wcześniej polu pułapek. Borsukoniedźwiedź będzie ścigał naszą postać, nawet jeśli ta wcześniej go nie zaatakuje. Jest też w stanie przejść za nią przez tunel robaka. Stwór ten ma 3 rodzaje ataków.